Витамин Д снижает эндотелиальную дисфункцию

Дисфункция эндотелия может способствовать развитию сердечно-сосудистых осложнений при хронической почечной недостаточности (ХПН). Риск смертности от сердечно-сосудистых заболеваний чрезвычайно высок у людей с хроническим заболеванием почек. Причина этому - ослабление эндотелиальной функции.

Нарушение функции почек приводит к прогрессирующему снижению 25 гидроксивитамина Д (25 (OH) Д) и 1,25-дигидроксивитамина Д (1,25 (OH) 2D) и белка, полученного из почек а-Клото. При этом наблюдается вторичный гиперпаратиреоз и увеличение уровня фактора роста фибробластов-23. 

Активный витамин Д используют в терапии сердечно-сосудистых осложнений при болезнях почек, но это требует клинических испытаний. Небольшое количество предыдущих исследований показали преимущества влияния парикальцитола на устойчивость эндотелия. Его добавка повысила уровень а-Клото в почках и сыворотке in vivo.

А-Kлотo представляет собой противовоспалительный белок, его дефицит связан с сердечно-сосудистыми проблемами, включающими артериосклероз, сосудистую кальцификацию и дисфункцию эндотелиальных клеток.

У людей дефицит сыворотки a-Kлото коррелирует с сердечно-сосудистыми осложнениями. Однако, прямая роль дефицита сыворотки a-Kлото в эндотелиальной дисфункции у пациентов с ХЗП не установлена. Исследователи планировали оценить способность активного витамина Д и парикальцитола для защиты эндотелия от повреждения вследствие уремии в степени, которой это зависело от увеличения концентрации a-Kлото.

Анализ эндотелиальной барьерной функции

Для эксперимента использовали 32 самца крыс, которым была сделана 3/4 нефрэктомия для индукции уремии. Четыре крысы умерли во время операции. После 1 недели восстановления животных кормили витамином Д.

Чтобы индуцировать экспрессию CYP24A1 и ускорить катаболизм эндогенных 25 (OH) Д, крысам подкожно вводили 32 нг парикальцитола 3 раза в неделю трёхнедельным курсом. Группы, не содержащие витамин Д, получили стандартную диету и пероральное введение парикальцитола 3 раза в неделю в течение 7 недель. Крысы контрольной группы получали только сахарную воду.

Перечень проведённых исследований:

• мочевину измеряли с помощью кинетического теста с уреазой и глутаматдегидрогеназой;
• креатинин был измерен методом косвенной иммунофлуоресценции;
• уровень витамина Д измерили с помощью анализа конкурентного связывающего белка и путем радиоиммуноанализа после иммуноэкстракции;
• анализ паратиреоидного гормона;
• оценка проницаемости сосудов путем введения красителя и гистологического анализа стенки сосудов после эвтаназии.

В комбинированной модели крыс с дефицитом витамина Д почечная недостаточность индуцировала сосудистую проницаемость и образование эндотелиальных щелей в грудной аорте независимо от исходного витамина Д, и это было ослаблено парикальцитолом.

Влияние на эндотелиальный барьер человека

Для измерения функции эндотелиального барьера использовались культуры клеток эндотелия пупочной артерии от здорового донора. После выделения клетки ресуспендировали и культивировали при 37 ° С и 5% СО2. Эксперименты проводили через 48 часов после посева.

Клетки подвергали воздействию парикальцитола и а-Клото, а затем изучали методом флуоресценции. Наблюдение показало, что парикальцитол эффективно улучшает восстановление эндотелиальной целостности, а также предотвращает образование эндотелиальных внутриклеточных разрывов.

Выводы

Результаты показали, что парикальцитол является фактором, стабилизирующим функцию эндотелиального барьера. Он ослабляет индуцированное эндотелиальное повреждение в грудной аорте и опосредует эндотелиальную стабильность in vitro, применяя межклеточные взаимодействия.